Häufig gestellte Fragen
Alle Antworten auf Ihre Fragen zu unserer Methode, unseren Produkten und unserem Unternehmen, auf einer einzigen Seite gesammelt.
Allgemein
Was ist ein VHH-Nanobody?
Ein VHH-Nanobody ist die isolierte variable Domäne eines Antikörpers mit ausschließlich schwerer Kette, der natürlicherweise von Kameliden wie Lamas produziert wird. Mit rund 15 kDa ist er etwa zehnmal kleiner als ein konventioneller Antikörper, behält jedoch eine starke Affinität und Spezifität für sein Ziel.
Warum Lamas für die Immunisierung verwenden?
Lamas produzieren ein besonders vielfältiges und robustes Repertoire an Schwerketten-Antikörpern. Ihre Immunisierungen werden gut vertragen, tierärztlich begleitet, und liefern hochwertiges genetisches Material (RNA) für den Aufbau von Nanobody-Bibliotheken.
Entsprechen Ihre Programme den EU-Tierschutzvorschriften?
Ja, alle unsere Immunisierungsprotokolle werden gemäß der EU-Richtlinie 2010/63 zum Schutz von Tieren, die für wissenschaftliche Zwecke verwendet werden, durchgeführt, mit vorheriger Genehmigung durch eine Ethikkommission und kontinuierlicher tierärztlicher Aufsicht.
Tierimmunisierung
Welche Tierarten verwenden Sie für die Immunisierung?
Unsere Kernaktivität ist die Immunisierung von Nutztieren, mit Lamas als vorrangiger Spezies, da ihre Immunantwort mit ausschließlich schwerer Kette besonders gut für die Erzeugung von VHH-Nanobodies geeignet ist. Je nach Projekt führen wir auch Programme bei Ziegen, Kaninchen und Geflügel durch.
Wie stellen Sie das Tierwohl während der Immunisierung sicher?
Jedes Protokoll wird vor der Durchführung einer Ethikkommission zur Prüfung vorgelegt, von qualifiziertem tierärztlichem Personal überwacht und folgt dem 3R-Prinzip (Replace, Reduce, Refine) gemäß der EU-Richtlinie 2010/63.
Wie lange dauert ein Immunisierungsprogramm?
Ein typischer Zeitplan erstreckt sich über etwa 8 bis 10 Wochen, einschließlich einer präimmunen Probe, mehrerer Grund- und Auffrischungsimmunisierungen, regelmäßiger serologischer Überwachung und einer abschließenden Probenentnahme zur RNA-Extraktion.
Kann ich mein eigenes Antigen für die Immunisierung bereitstellen?
Ja, Immunisierungsprogramme werden individuell um das vom Kunden oder Forschungsprojekt bereitgestellte Antigen herum gestaltet, mit einem auf dessen Art und das angestrebte wissenschaftliche Ziel zugeschnittenen Protokoll.
RNA-Extraktion
Welches Gewebe wird am häufigsten für die RNA-Extraktion verwendet?
Peripheres Blut ist die am häufigsten verwendete Quelle: Lymphozyten (PBL) oder mononukleäre Zellen (PBMC) werden daraus durch Dichtegradientenzentrifugation isoliert. Es ist die am wenigsten invasive Methode, kompatibel mit wiederholter Probenahme über Immunisierungsauffrischungen hinweg.
Warum Lymphknoten oder Milz statt Blut verwenden?
Diese tieferen lymphatischen Gewebe konzentrieren mehr reife Plasmazellen und ermöglichen die Anreicherung von Bibliotheken mit hochaffinen Antikörpern, allerdings auf Kosten einer invasiveren Entnahme als der Standardweg über Blut.
Wie schnell nach der Probenahme wird die RNA extrahiert?
Die Extraktion erfolgt unmittelbar nach der Probenahme, am selben Tag, um die RNA-Integrität zu erhalten und einen für den Bibliotheksaufbau geeigneten RIN-Score zu erzielen.
Welche Methode verwenden Sie zur Extraktion der Gesamt-RNA?
Wir verwenden eine Referenzmethode mit Guanidiniumthiocyanat-Phenol-Chloroform, die in der wissenschaftlichen Literatur ausführlich für die RNA-Extraktion zur RT-PCR-Amplifikation des VHH-Repertoires beschrieben ist.
Qualitätskontrolle
Was ist der RIN- (oder RINe-) Score?
RIN (RNA Integrity Number) und sein TapeStation-Äquivalent RINe sind Scores von 1 bis 10, die die Integrität einer RNA-Probe anhand ihres Kapillarelektrophorese-Profils quantifizieren. Je höher der Score, desto intakter die RNA.
Warum Qubit statt eines Standard-Spektrophotometers verwenden?
Qubit misst die Fluoreszenz eines Farbstoffs, der spezifisch an RNA bindet, wodurch es weniger empfindlich gegenüber Kontaminanten ist als die Spektrophotometrie (z. B. Nanodrop) und somit eine genauere Schätzung der tatsächlichen RNA-Konzentration liefert.
Welchen RIN-Score verlangen Sie vor der Freigabe einer Charge?
Wir wenden einen Schwellenwert von RINe ≥ 7,0 für jede für den VHH-Bibliotheksaufbau bestimmte Charge an, zusammen mit A260/280- und A260/230-Reinheitsverhältnissen zwischen 1,8 und 2,1.
Was passiert, wenn eine Charge die Qualitätskontrolle nicht besteht?
Eine Charge mit unzureichender Integrität oder Reinheit wird weder versendet noch in einem Bibliotheksprojekt verwendet: Eine neue Probe wird vor der Freigabe extrahiert und qualifiziert.
Produkte & Bestellung
Was ist „naive“ RNA?
Naive RNA wird aus einem Tier extrahiert, das keiner gezielten Immunisierung unterzogen wurde. Sie ermöglicht den Zugang zum natürlichen Antikörper-Repertoire der Spezies, nützlich für semi-synthetische Bibliotheken oder Referenzstudien, ohne auf einen Immunisierungszyklus zu warten.
Welche Spezies bieten Sie an?
Wir bieten naive RNA von Lama, Ziege, Kaninchen und Huhn an, nach denselben Standards qualifiziert. Weitere Spezies können auf Anfrage geprüft werden.
Wie lang ist die Lieferzeit?
Vorrätige Chargen werden innerhalb von 48 Std. auf Trockeneis versendet. Für individuelle Volumina oder Formate wird der Zeitrahmen im Angebot mitgeteilt.
Welcher RIN-Score wird garantiert?
Jede versendete Charge weist einen RINe-Score von 7,0 oder höher auf, mit beigefügtem Qualitätskontrollzertifikat (Qubit und TapeStation).
Bieten Sie auch RNA von immunisierten Tieren an?
Ja, zusätzlich zu unseren naiven RNA-Beständen konzipieren wir individuelle Immunisierungsprogramme — siehe unsere Seite zur Tierimmunisierung.
Wissenschaftliche Anwendungen
Werden VHH-Nanobodies klinisch eingesetzt?
Ja, mehrere VHH-Nanobodies haben fortgeschrittene klinische Stadien erreicht oder eine Zulassung erhalten, insbesondere zur Behandlung seltener hämatologischer Erkrankungen. Ihr Einsatz erstreckt sich heute auch auf Onkologie, Autoimmunität und Infektionskrankheiten.
Welche Nanobody-Formate sind für diese Anwendungen möglich?
VHHs können allein, in bivalenten oder bispezifischen Formaten, an eine Fc-Domäne fusioniert zur Verlängerung der Halbwertszeit, oder je nach Anwendung an zytotoxische Wirkstoffe, Radioisotope oder Fluorophore gekoppelt verwendet werden.
Entwickelt RNACOREX direkt therapeutische Kandidaten?
RNACOREX konzentriert sich auf die Tierimmunisierung und die Bereitstellung von hochwertigem Ausgangsmaterial (RNA, Bibliotheken). Die Entwicklung therapeutischer Kandidaten erfolgt durch unsere akademischen und industriellen Partner auf Basis dieses Materials.
Unternehmen & Kontakt
Wo hat RNACOREX seinen Sitz?
RNACOREX ist ein französisches Unternehmen, eingetragen unter der SIREN-Nummer 953 377 900 (RCS Besançon), mit Sitz in Avanne-Aveney, im Département Doubs.
Wie schnell erhalte ich eine Antwort?
Wir antworten in der Regel innerhalb von 1–2 Werktagen auf jede Angebotsanfrage oder technische Frage.
Wie fordere ich ein Angebot für naive RNA an?
Nutzen Sie unser Kontaktformular unter Angabe der Spezies, der benötigten Menge und Ihres Zeitrahmens, oder schreiben Sie direkt an info@rnacorex.com.