Perguntas frequentes
Todas as respostas às suas perguntas sobre o nosso método, os nossos produtos e a nossa empresa, reunidas numa só página.
Geral
O que é um nanocorpo VHH?
Um nanocorpo VHH é o domínio variável isolado de um anticorpo de cadeia pesada única, produzido naturalmente por camelídeos como a lama. Com cerca de 15 kDa, é cerca de dez vezes mais pequeno do que um anticorpo convencional, mantendo uma forte afinidade e especificidade para o seu alvo.
Porquê usar a lama para a imunização?
A lama produz um repertório de anticorpos de cadeia pesada particularmente diversificado e robusto. As suas imunizações são bem toleradas, acompanhadas por seguimento veterinário, e permitem obter material genético (ARN) de alta qualidade para a construção de bancos de nanocorpos.
Os vossos programas cumprem a regulamentação europeia de bem-estar animal?
Sim, todos os nossos protocolos de imunização são conduzidos em conformidade com a Diretiva 2010/63/UE relativa à proteção dos animais utilizados para fins científicos, com aprovação prévia de uma comissão de ética e supervisão veterinária contínua.
Imunização animal
Que espécies animais utilizam para a imunização?
A nossa atividade principal é a imunização de animais de quinta, com a lama como espécie prioritária, uma vez que a sua resposta imunitária de cadeia pesada única é particularmente adequada para gerar nanocorpos VHH. Também realizamos programas em cabras, coelhos e aves consoante o projeto.
Como garantem o bem-estar animal durante a imunização?
Cada protocolo é submetido ao parecer prévio de uma comissão de ética, acompanhado por pessoal veterinário qualificado, e segue o princípio dos 3R (Substituir, Reduzir, Refinar) em conformidade com a Diretiva 2010/63/UE.
Quanto tempo dura um programa de imunização?
Um calendário típico estende-se por cerca de 8 a 10 semanas, incluindo uma colheita pré-imune, várias injeções de indução e reforço, monitorização serológica regular, e uma colheita final destinada à extração de ARN.
Posso fornecer o meu próprio antigénio para a imunização?
Sim, os programas de imunização são concebidos à medida em torno do antigénio fornecido pelo cliente ou pelo projeto de investigação, com um protocolo adaptado à sua natureza e ao objetivo científico pretendido.
Extração de ARN
Qual é o tecido mais utilizado para a extração de ARN?
O sangue periférico é a fonte mais frequentemente utilizada: os linfócitos (PBL) ou células mononucleares (PBMC) são isolados por gradiente de densidade. É o método menos invasivo, compatível com colheitas repetidas ao longo dos reforços de imunização.
Porquê usar gânglios linfáticos ou baço em vez de sangue?
Estes tecidos linfoides profundos concentram mais plasmócitos maduros e permitem enriquecer os bancos com anticorpos de alta afinidade, ao custo de uma colheita mais invasiva do que a via sanguínea padrão.
Quanto tempo após a colheita o ARN é extraído?
A extração é realizada imediatamente após a colheita, no mesmo dia, para preservar a integridade do ARN e obter uma pontuação RIN compatível com a construção de bancos.
Que método utilizam para extrair o ARN total?
Utilizamos um método de referência com tiocianato de guanidínio e fenol-clorofórmio, amplamente descrito na literatura científica para a extração de ARN destinado à amplificação por RT-PCR do repertório VHH.
Controlo de qualidade
O que é a pontuação RIN (ou RINe)?
O RIN (RNA Integrity Number) e o seu equivalente TapeStation, o RINe, são pontuações de 1 a 10 que quantificam a integridade de uma amostra de ARN a partir do seu perfil de eletroforese capilar. Quanto mais elevada a pontuação, mais intacto está o ARN.
Porquê usar Qubit em vez de um espetrofotómetro convencional?
O Qubit mede a fluorescência de um corante que se liga especificamente ao ARN, tornando-o menos sensível a contaminantes do que a espetrofotometria (tipo Nanodrop), e por isso mais preciso para estimar a concentração real de ARN.
Que pontuação RIN exigem antes de validar um lote?
Aplicamos um limiar de RINe igual ou superior a 7,0 para qualquer lote destinado à construção de bancos VHH, juntamente com razões de pureza A260/280 e A260/230 entre 1,8 e 2,1.
O que acontece se um lote não passar no controlo de qualidade?
Um lote com integridade ou pureza insuficientes não é expedido nem utilizado num projeto de banco: uma nova amostra é extraída e qualificada antes da validação.
Produtos e encomendas
O que é o ARN «naïve»?
O ARN naïve é extraído de um animal que não foi submetido a uma imunização dirigida. Permite aceder ao repertório de anticorpos natural da espécie, útil para bancos semissintéticos ou estudos de referência, sem esperar por um ciclo de imunização.
Que espécies oferecem?
Oferecemos ARN naïve de lama, cabra, coelho e frango, qualificado segundo os mesmos padrões. Outras espécies podem ser avaliadas mediante pedido.
Qual é o prazo de entrega?
Os lotes em stock são expedidos em 48h em gelo seco. Para volumes ou formatos à medida, o prazo é comunicado na fase de orçamento.
Que pontuação RIN é garantida?
Cada lote expedido apresenta uma pontuação RINe igual ou superior a 7,0, com certificado de controlo de qualidade (Qubit e TapeStation) incluído.
Também oferecem ARN proveniente de animais imunizados?
Sim, além dos nossos stocks de ARN naïve, concebemos programas de imunização à medida — veja a nossa página dedicada à imunização animal.
Aplicações científicas
Os nanocorpos VHH são utilizados na clínica?
Sim, vários nanocorpos VHH atingiram fases clínicas avançadas ou obtiveram aprovação, nomeadamente no tratamento de patologias hematológicas raras. A sua utilização estende-se hoje à oncologia, autoimunidade e doenças infeciosas.
Que formatos de nanocorpos são possíveis para estas aplicações?
Os VHH podem ser utilizados isoladamente, em formatos bivalentes ou biespecíficos, fundidos a um domínio Fc para prolongar a sua semivida, ou conjugados com agentes citotóxicos, radioisótopos ou fluoróforos consoante a aplicação pretendida.
A RNACOREX desenvolve diretamente candidatos terapêuticos?
A RNACOREX foca-se na imunização animal e no fornecimento de material de partida (ARN, bancos) de alta qualidade. O desenvolvimento de candidatos terapêuticos é realizado pelos nossos parceiros académicos e industriais a partir deste material.
Empresa e contacto
Onde está sediada a RNACOREX?
A RNACOREX é uma empresa francesa registada sob o número SIREN 953 377 900 (RCS Besançon), com sede social em Avanne-Aveney, no departamento do Doubs.
Em quanto tempo receberei uma resposta?
Respondemos habitualmente em 1 a 2 dias úteis a qualquer pedido de orçamento ou pergunta técnica.
Como peço um orçamento de ARN naïve?
Utilize o nosso formulário de contacto especificando a espécie, a quantidade pretendida e o seu prazo, ou escreva diretamente para info@rnacorex.com.